Passos específics per extreure la clorofil·la mitjançant la fragmentació cel·lular mitjançant una trituradora de cèl·lules ultrasòniques

La trituradora de cèl·lules per ultrasons utilitza l'efecte de dispersió dels ultrasons en líquid per crear cavitació, trencant així partícules sòlides o teixits cel·lulars al líquid.
El desenvolupament de la indústria biològica ha augmentat els requisits per als experiments amb pulveritzadors de cèl·lules ultrasòniques, com ara mesurar i controlar la temperatura de la mostra, millorar el nivell d'intel·ligència de les mostres de refrigeració a baixa temperatura i tota la màquina, etc.
Els passos específics per extreure la clorofil·la mitjançant la trituració de cèl·lules ultrasòniques mitjançant una trituradora de cèl·lules ultrasòniques:
1. Centrifugueu o filtreu la mostra d'aigua i instal·leu una membrana de filtre de fibra d'acetat al filtre d'aspiració. Aboqui un volum quantitatiu de mostra d'aigua per a la filtració i la pressió negativa durant la filtració no hauria de ser massa alta (uns 50 kPa). Després de treure la mostra d'aigua, continueu extregant durant 1-2 minuts per reduir la humitat a la membrana del filtre. Si cal emmagatzemar-lo a curt termini durant 1-2 dies, es pot emmagatzemar en una nevera normal per congelar-lo. Si es requereix un emmagatzematge a llarg termini (30 dies), s'ha d'emmagatzemar en una nevera a baixa temperatura (-20 grau).
2. Traieu la membrana del filtre que conté fitoplàncton i assequeu-la a baixa temperatura a la nevera durant 6-8 hores. Talleu-lo a trossos petits amb unes tisores i col·loqueu-lo en un tub de centrífuga de 5 ml o 10 ml. Afegiu 3-4 ml d'acetona al 90% per submergir els fragments per sota del nivell del líquid. Col·loqueu els fragments en un recipient d'ultrasons i utilitzeu ones ultrasòniques per trencar les cèl·lules de la mostra. (Comparació d'experiments en diferents moments i freqüències per facilitar la identificació del * temps i freqüència de fragmentació per a mètodes unificats).
3. Centrifugueu la mostra sotmesa a fragmentació cel·lular mitjançant ultrasons mitjançant una centrífuga (3000-4000r/min) durant 10 minuts. Aboqui el sobrenedant en un matràs aforat de 5 ml o 10 ml. Diluir a 5 ml o 10 ml amb acetona al 90% i agitar bé.
4. Col·loqueu el sobrenedant en un espectrofotòmetre i utilitzeu un plat colorimètric de recorregut òptic d'1 cm per llegir els valors d'absorbància a longituds d'ona de 750 nm, 663 nm, 645 nm i 630 nm, respectivament. Utilitzeu acetona al 90% com a mesura d'absorbància en blanc per corregir l'absorbància de la mostra.